在我的网络研讨会上，我经常被问到的一个问题是关于生物扫描电子成像和收集能量色散x射线能谱(EDS)图的技巧和技巧。
这里有一个方便的列表，可以帮助你得到最好的显微镜。
减少或取消收费
生物扫描电镜和其他非导电样品的充电是一个大问题。它也会影响你的EDS结果，如果可能的话，应该从你的样品中删除。你可以使用以下几种策略。
优化您的SEM样品制备，使您的样品尽可能导电
- 薄切片组织/样品不容易带电。在网格上使用树脂嵌入样品，并使用STEM支架进行扫描电镜，或将部分直接放在导电基板上，如铝根或硅晶圆。
- 根据您的应用程序，将散装样例调整到尽可能小的体积。如果你正在观察一个组织，器官或有机体的部分，试着解剖样本，去除一些大块，优化你的图像。
- 使用重金属污渍来提高样品的导电性和可视性。
- 在样品表面涂上导电材料(如碳、金、铂/钯)。有些涂层可能会影响您的EDS结果，所以请确保您选择了正确的应用程序。
- 确保样品正确地附着在导电基板上，并牢固地附着在显微镜台上。
- 在样品的边缘使用银漆或其他导电介质。
优化成像条件
- 减少停留时间。光束停留在任何特定区域的时间越长，充电对图像和数据的影响就越大。对于EDS应用，万博电脑网页版登录使用非常短的停留时间收集多帧，与单帧上的长停留时间相比，采样损伤更小。
- 减小光束电流，孔径大小和/或加速电压。这可能会导致较低的x射线发射，这可以通过使用敏感的EDS探测器和较长时间的数据采集来缓解。
- 对于非常薄的样品，考虑增加加速电压，更大的相互作用体积可以帮助通过导电基板驱散电荷，或者可以在SEM成像中使用STEM。
- 改变你正在使用的探测器，例如，使用背散射电子(BSE)探测器而不是二次电子(SE)探测器。BSE信号受充电影响较小，这意味着您可能能够获得样品的图像。
优化你的显微镜
- 使用变压系统或气体流动在样品上方，这可以帮助驱散样品中的电荷，否则无法成像。
- 样品/级偏置有助于充电的积累，并允许您成像正在充电的样品。
- 使用高倾斜或STEM支架的薄截面，这样大部分的光束相互作用体积落在样品之外，从而减少电荷积聚。不过，这只适用于特定的样本。
所示的样品是镀金的松花粉。一些花粉颗粒在被成像时不能很好地接触表面，并带电，造成失真。BSE成像不容易因充电而失真。
提高图像中的信息质量
分辨率和图像质量是非常重要的分析你的数据和什么时候你想要发布。
提高你的电子图像分辨率
- 确保您的柱和光圈正确对齐，并使用柱头校正散光。后者对于获得最佳分辨率尤为重要。下面的视频展示了在柱头被调整之前，要获得清晰的焦点是多么困难。
- 缩短工作距离(样品与物镜之间的距离)。工作距离越低，分辨率越高，但这也会影响你的视野、焦点深度和信号强度。大多数sem和不同的探测器都有一个最佳的工作距离。
- 降低加速电压(kV)。这将减少样品波束相互作用的体积，并确保您的信号来自一个小的区域，但这也会降低您的信号，实现图像分辨率和信号之间的平衡是很重要的。
- 减慢扫描速度/增加像素停留时间。这将提高样本的信号量，减少噪声。如果你的样品漂移或充电缓慢的扫描速度将使情况更糟。长像素停留时间也会导致样品损坏。
改进EDS地图
- 确保你激活了感兴趣的x射线线。这可能需要你做一些调查。通常情况下，你会希望有一个加速电压刚好是你所寻找的x射线线能量的两倍多。
- 增加光束电流对x射线产率有显著影响。Ultim Extreme这样的探测器在x射线数量较少的情况下工作得很好，但较小的EDS探测器或不能接近样品的探测器可能需要更多的x射线，这可以通过增加光束电流或孔径大小来实现。
- 增加帧数。从生物样品中获取数据通常比从材料样品中获取数据要花更长的时间，因此获取时间也应相应延长。如果你的样品容易损坏或充电，最好的方法是获得更多的帧。如果您试图映射非常小的结构或具有较低浓度的元素，这是特别重要的。
- 使用适当的放大率。确保你的图像分辨率和放大率合理。如果你的像素尺寸明显更大，就没有必要尝试映射10nm的金颗粒。
- 使用合适的EDS检测器进行研究。大多数生物EDS都可以使用Ultim Extreme探测器进行采集，这使您能够优化图像分辨率，缩短工作距离和低kV，而不影响您的EDS数据采集。
视频显示的是一只蝴蝶的翅膀。改进列的对齐对最终图像的质量有很大的不同。
你有什么好的建议和技巧来提高你的成像能力吗?下面的评论
